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[分享] 经验:液相 浓度流速对峰面积相差很大

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发表于 2010-1-30 15:09:33 显示全部楼层 |阅读模式
手头上在做一个小分子肽的质量标准,遇到一个问题是:采用210nm波长,同一浓度流速为1.5ml/min时峰面积接近200,当流速为1ml/min 时峰面积变成320左右,这两个流速交叉换了几次都是这种情况。之前知道流速对峰响应有影响,但是峰面积差这么多的情况还是第一次遇到。

我的解释是:

1.HPLC的原理是根据样品在不同流动相中的溶解度不同而达到分离,峰面积代表了样品含量的多少,流速增加则流动相中溶解的样品相应减少,峰面积变小;

2.峰面积的响应值是根据检测器对样品和流动相相应的相对差值得到的,我采用的210nm检测波长靠近末端吸收,流速对这种相对差值的影响更加灵敏。

一点点拙见,不恰之处望大家指正。

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Agilent 四元比例阀漏液问题分析及解决方案
发表于 2010-6-17 14:22:23 显示全部楼层
浓度型的检测器,流速对面积峰应该影响不大啊。
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